制備柱是氣液相的關鍵部件，主要由兩大類組成，毛細管柱和填充柱，其中毛細管柱由兩部分組成：管線和固定相，管線主要有熔融石英和不銹鋼兩種。固定相是色譜分離的關鍵，它有很多種，大多數(shù)是高分子量、熱穩(wěn)定性好的聚合物，這些聚合物是液體或膠，常用的是聚硅氧烷和聚乙二醇，還有另外常用的固定相是小的多孔顆粒，由聚合物和沸石組成，在色譜實驗過程中選擇合適的產品對實驗的順利開展和實驗結果的性而言是十分重要的。

 

　　今天咱們來聊一聊制備柱的選擇方法：

 

　　1、填料基質

 

　?。?）硅膠基質：純度高本錢低，強度大，化學修飾輕易，但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩(wěn)定，但經過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩(wěn)定在pH1.5-10。

 

　?。?）聚合物基質：應用pH值范圍寬，溫度穩(wěn)定(高溫可以達到80度以上)，機械強度小。

 

　　2、顆粒外形

 

　　大多現(xiàn)代HPLC填料都是球形顆粒，但有時是不規(guī)則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩(wěn)定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規(guī)則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。

 

　　3、顆粒粒徑

 

　　粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時會導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品，UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。

 

　　4、含碳量

 

　　含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關。高含碳量進步柱容量、分辨率及分析時間，用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時間短、展現(xiàn)不同的選擇性，用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。